http://ir.buu.ac.th/dspace/handle/1513/43 Faculty of Allied Health Sciences / คณะสหเวชศาสตร์ 2024-12-25T02:36:03Z http://ir.buu.ac.th/dspace/handle/1513/1046 Title: The effect of Celastrus paniculatus seed extract on synaptic plasticity and memory enhancement in hippocampus ; ผลของสารสกัดจากเมล็ดกระทงลายต่อกระบวนการ synaptic plasticity และการเพิ่มความจำในสมองส่วนฮิปโปแคมปัส Abstract: Previous studies have found that Celastrus paniculatus (CP) seeds contain bioactive compounds related to antioxidant, anti-inflammatory, and neuroprotective properties. However, there has been no study of the effect of CP seed extract on synaptic plasticity and memory enhancement in the hippocampus. Therefore, this study aims to investigate the effect and mechanism of CP seed extract on memory formation activities. 18 male Sprague Dawley rats were divided into 3 groups with the first treated with 5% Dimethylsulfoxide (DMSO), the second with 80 mg/kg CP seed extract, and the third with 1.5 mg/kg Donepezil by intraperitoneal (i.p.) administration for 2 weeks. Spatial memory behavior was tested by Morris Water Maze. After that hippocampi were removed, the expression of proteins involved in important memory formation, including phosphorylation of AMPA receptor GluR1 subunit (phospho-GluR1), activity-regulated cytoskeleton-associated protein (Arc), brain-derived neurotrophic factor (BDNF) and postsynaptic density protein 95 (PSD-95) by Western blot technique and/or immunohistochemistry. In addition, histopathological changes were studied by using Hematoxylin and Eosin (H&E) staining. The behavioral results showed that CP-treated group significantly decreased the escape latency and increased time in quadrant as well as crossing frequency of platform compared to control. In addition, molecular studies showed that CP-treated group had higher phospho-GluR1 expression on membrane and decreased in cytosol. The results were consistent with the expression of Arc, BDNF, and PSD-95 that the expression increase with statistical significance in CP-treated group. It has been shown that CP enhances memory by increasing the expression of AMPA glutamate receptors on cell membrane, which is the process of the activity-dependent trafficking of AMPA receptors (AMPARs) to the synapse. Moreover, it also increases the expression of key structural proteins that are indicative of synaptic plasticity, including Arc and PSD-95. Therefore, our finding demonstrates that CP induces hippocampal synaptic plasticity to enhance learning and memory.; จากการศึกษาที่ผ่านมาพบว่าเมล็ดกระทงลาย (Celastrus paniculatus: CP) มีสารออกฤทธิ์ทางชีวภาพที่สัมพันธ์กับคุณสมบัติการต้านอนุมูลอิสระ ต้านอักเสบ และมีฤทธิ์ส่งเสริมการทำงานของระบบประสาท อย่างไรก็ตาม ยังไม่มีการศึกษาผลของสารสกัดจากเมล็ดกระทงลายต่อกระบวนการ synaptic plasticity และการเพิ่มความจำ ดังนั้นงานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลและกลไกของสารสกัดจากเมล็ดกระทงลายต่อการสร้างความจำในหนูแรทเพศผู้ โดยใช้หนูแรทเพศผู้ อายุ 5 สัปดาห์ จำนวน 18 ตัว แบ่งเป็น 3 กลุ่ม กลุ่มละ 6 ตัว ได้แก่ 1) กลุ่มที่ได้รับ 5% Dimethylsulfoxide (DMSO) 2) กลุ่มที่ได้รับสารสกัดจากเมล็ดกระทงลาย ขนาด 80 มก./กก. และ 3) กลุ่มที่ได้รับยากระตุ้นความจำ Donepezil ขนาด 1.5 มก./กก. โดยฉีดเข้าทางช่องท้องเป็นเวลา 2 สัปดาห์ จากนั้นนำมาศึกษาพฤติกรรมการเรียนรู้และความจำเชิงทิศทางด้วยวิธี Morris Water Maze และศึกษาการแสดงออกของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับกลไกการสร้างความจำผ่านกระบวนการ synaptic plasticity ได้แก่ phosphorylation of AMPA receptor GluR1 subunit (phospho-GluR1), activity-regulated cytoskeleton-associated protein (Arc), brain-derived neurotrophic factor (BDNF) และ postsynaptic density protein 95 (PSD-95) ในสมองส่วนฮิปโปแคมปัสด้วยวิธี Western blot และ/หรือ Immunohistochemistry นอกจากนี้ยังทำการศึกษาทางจุลพยาธิวิทยาของฮิปโปแคมปัสด้วยการย้อมสี Hematoxylin and Eosin (H&E) ผลการทดลองด้านพฤติกรรมพบว่ากลุ่มที่ได้รับ CP ใช้เวลาในการหาแท่นใต้น้ำลดลงอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม รวมถึงใช้เวลาว่ายวนอยู่ในบริเวณที่เคยมีแท่นใต้น้ำ และความถี่ของการว่ายข้ามจุดที่เคยมีแท่นใต้น้ำเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ โดยกลุ่มที่ได้รับ Donepezil ไม่มีความแตกต่างจากกลุ่มควบคุม นอกจากนี้การศึกษาทางด้านโมเลกุลแสดงให้เห็นว่ากลุ่มที่ได้รับ CP มีการแสดงออกของโปรตีน phospho-GluR1 เพิ่มขึ้นบน membrane และลดลงใน cytosol และให้ผลสอดคล้องกับการแสดงออกของ Arc, BDNF และ PSD-95 ที่พบว่าเพิ่มขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติในกลุ่มที่ได้รับ CP แสดงให้เห็นว่า CP มีฤทธิ์เพิ่มความจำได้ โดยเพิ่มการแสดงออกของตัวรับกลูตาเมทชนิด AMPA ที่ cell membrane ซึ่งจัดอยู่ในกระบวนการเคลื่อนที่ของ AMPA receptor นอกจากนี้ยังเพิ่มการแสดงออกของโปรตีนโครงสร้างสำคัญที่บ่งชี้ถึง synaptic plasticity ได้แก่ Arc และ PSD-95 ดังนั้นงานวิจัยนี้สามารถสรุปได้ว่า CP เหนี่ยวนำให้เกิดกระบวนการ synaptic plasticity ซึ่งเป็นกลไกสำคัญของการเพิ่มความจำในสมอง 0012-01-01T00:00:00Z http://ir.buu.ac.th/dspace/handle/1513/832 Title: Effects of asparagus capsule consumption on blood sugar and lipids and oxidative stress in overweight and obese participants; ผลของการบริโภคแคปซูลหน่อไม้ฝรั่งต่อระดับน้ำตาลและไขมันในเลือด และภาวะเครียดออกซิเดชัน ในอาสาสมัครที่มีน้ำหนักเกินและอ้วน Abstract: This study aimed to explore and compare effects of asparagus capsule consumption on blood sugar, lipids and oxidative stress in overweight and obese participants. The study design was cross-sectional. Participants were 44 overweight and obese persons, male and female, age 18-59 years. Participants were divided into 2 groups consisting of 23 asparagus capsules and 21 Placebo capsules groups. They received health screenings including history taking, mental health questionnaire, and vital signs, height and body weight, body composition, fat distribution measurements and Oral glucose tolerance test. Then, a venipuncture was conducted to determine blood glucose, insulin, lipids malondialdehyde and protein carbonyl levels. Analysis of covariance [ANCOVA] was used to analyze parameters between groups and Paired t-test was used to analyze parameters intra-group. Consumption of asparagus capsules reduced Waist/hip ratio in overweight and obese subjects. The information obtained may be useful for those at risk or those who want to control their blood sugar and lipid levels. and used in medical nutritional therapy.; การศึกษาครั้งนี้มีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาและเปรียบเทียบผลการบริโภคแคปซูลหน่อไม้ฝรั่งและยาหลอก ต่อระดับน้ำตาล  ระดับอินซูลิน และระดับไขมันในเลือด ภาวะเครียดออกซิเดชัน ในอาสาสมัครที่มีน้ำหนักเกินและอ้วน รูปแบบการศึกษาเป็นแบบภาคตัดขวาง อาสาสมัครที่เข้าร่วมการวิจัยเป็นผู้ที่มีน้ำหนักเกินและอ้วน จำนวน 44 คน เพศชายและหญิง อายุระหว่าง 18-59 ปี แบ่งอาสาสมัครออกเป็น 2 กลุ่ม คือ กลุ่มบริโภคแคปซูล Placebo จำนวน 21 คน และกลุ่มบริโภคแคปซูลหน่อไม้ฝรั่ง จำนวน 23 คน  อาสาสมัครได้รับการตรวจคัดกรองสุขภาพ ได้แก่ การซักประวัติ การตอบแบบสอบถามสุขภาพทั่วไป การตรวจวัดสัญญาณชีพ ส่วนสูงและน้ำหนักตัว องค์ประกอบของร่างกาย และการกระจายของไขมันในร่างกาย  วัดระดับน้ำตาลในเลือดหลังบริโภคน้ำตาลกลูโคส จากนั้นอาสาสมัครได้รับการเจาะเลือดทางหลอดเลือดดำ เพื่อตรวจวัดระดับน้ำตาล อินซูลิน ไขมันในเลือดและ ระดับ Malondialdehyde และ Protein carbonyl วิเคราะห์ความแตกต่างของตัวแปรระหว่างกลุ่มด้วยสถิติวิเคราะห์ความแปรปรวนร่วม (Analysis of covariance [ANCOVA]) และวิเคราะห์ความแตกต่างของตัวแปรภายในกลุ่มด้วยสถิติ Paired t-test  ผลการศึกษาครั้งนี้สามารถสรุปได้ว่าการบริโภคแคปซูลหน่อไม้ฝรั่งลดอัตราส่วนเส้นรอบเอวต่อรอบสะโพก ในอาสาสมัครที่มีน้ำหนักเกินและอ้วนได้  ข้อมูลที่ได้อาจเป็นประโยชน์ในการนำไปใช้กับผู้ที่มีความเสี่ยงหรือผู้ที่ต้องการควบคุมระดับน้ำตาลและไขมันในเลือด และใช้ในทางโภชนบำบัดทางการแพทย์ต่อไป 0012-01-01T00:00:00Z http://ir.buu.ac.th/dspace/handle/1513/641 Title: THE STUDY OF MAGNESIOTROPIC PROTEIN ON INTESTINAL EPITHELIUM IN OMEPRAZOLE - INDUCED HYPOMAGNESEMIA RATS; การศึกษาโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการควบคุม Mg2+ ในเยื่อบุลำไส้หนูขาวที่อยู่ในภาวะ Hypomagnesemia จากการได้รับ Omeprazole Abstract: Proton pump inhibitors (PPIs) are the common therapeutic medicine for acid peptic disorders. Prolong PPIs used induced hypomagnesemia (PPIH) is a serious side effect of PPIs. Our previous studies reported that prolong Omeprazole 12- and 24-weeks injection suppressed small intestinal Mg2+ absorption especially duodenum and induced hypomagnesemia, although TRPM6 and CNNM4 proteins which transport Mg2+ through villous epithelial enterocyte significantly increased. Therefore, the present study aimed to observed the distribution of TRPM6, TRPM7 and CNNM4 in duodenum, jejunum, ileum, and colon of PPIH rats from our previous study. Proteins from duodenal, jejunal, ileal and colon tissues were subjected to perform western blot analysis for observe the expression of TRPM6, TRPM7, and CNNM4 expression. The results demonstrated that proteins significantly increased in whole small intestinal parts of both 12- and 24-weeks Omeprazole injected rats compared with vehicle-injected rats. Separated membranous and cytosolic protein were subjected to perform western blot analysis for identify located protein expression. The result demonstrated that membranous TRPM6 significantly increased while cytosolic TRPM6 significantly decreased in duodenum, jejunum, ileum and colon of Omeprazole injected rats compared with vehicle-injected rats. Whereas membranous TRPM7 expression markedly decreased but cytosolic TRPM7 significantly increased in duodenum, jejunum of both PPIH rat groups (12 and 24 wks) compared with vehicle-injected rats. Moreover, immunoprecipitated TRPM6 (TRPM6-IP) protein expression in membrane were observed, then identify TRPM7 protein expression in TRPM6-IP, the results revealed that TRPM7 protein expression significantly decreased in duodenum and jejunum of both PPIH rat groups. This result indicated that   TRPM6/TRPM7 heterodimer markedly decreased. Then liquid chromatography coupled with electrospray ionization-quadrupole-time of flight-mass spectrometry (LC-ESI-QTOF-MS/MS) analysis were performed to observe phosphorylation site of TRPM6 membranous protein, the results shown that peptide base W1814 to C1838 were disappeared in α-kinase domain of 24-weeks Omeprazole injected rats.  these results explained why Mg2+ absorption still decreased, although proteins were up-regulated in small intestine of PPIH rats. Furthermore, membranous CNNM4 protein expression significantly increased but cytosolic CNNM4 protein expression markedly decreased in duodenum, jejunum, ileum and colon of both PPIH rat groups. The result indicated that small intestine has alteration for mg2+ absorption.; ยากลุ่ม proton pump inhibitors (PPIs) เป็นยายับยั้งการหลั่งกรดในกระเพาะอาหารที่ใช้กันแพร่หลาย ข้อมูลทางการแพทย์บ่งชี้การใช้ยา PPIs มีผลให้ระดับ Mg2+ ในเลือดต่ำกว่าปกติ (PPIs-induced hypomagnesemia, PPIH) โดยน่าจะเกิดจากการกดการดูดซึม Mg2+ ในลำไส้  การศึกษาก่อนหน้าของคณะผู้วิจัยพบว่าการฉีดยา Omeprazole ซึ่งเป็น PPIs ที่ได้รับความนิยมมากที่สุด เป็นเวลา 12 และ 24 สัปดาห์ในหนูขาว เหนี่ยวนำให้เกิดภาวะระดับ Mg2+ ในเลือดต่ำกว่าปกติ โดยพบว่ามีการกดการดูดซึม Mg2+ ในลำไส้ส่วน duodenum jejunum ileum และ colon โดยมีการกดการดูดซึมในลำไส้ส่วน duodenum มากที่สุด นอกจากนี้ยังพบว่ามีการแสดงของโปรตีนที่สำคัญต่อการดูดซึม Mg2+ คือ transient receptor potential melastatin 6 (TRPM6) และ ancient conserved domain protein 4 (CNNM4) เพิ่มขึ้นในลำไส้ทุกส่วน อย่างไรก็ตาม มีคำถามสำคัญเกิดขึ้นคือ เหตุใดการแสดงออกที่เพิ่มขึ้นของโปรตีนข้างต้น กลับไม่สามารถเพิ่มการดูดซึม Mg2+ ในลำไส้ และลดภาวะ PPIH ได้ ดังนั้นงานวิจัยนี้จึงมุ่งเน้นศึกษาตำแหน่งการแสดงออก และความความผิดปกติของโปรตีนที่เกี่ยวข้องกับการขนส่ง Mg2+ ในลำไส้ของหนูขาวที่มีภาวะ PPIH โดยใช้ตัวอย่างจากลำไส้ของหนูขาวกลุ่มควบคุม และกลุ่มที่ได้รับ Omeprazole 12 และ 24 สัปดาห์  ทำการศึกษาด้วยเทคนิค Western blot พบว่า โปรตีน TRPM6 TRPM7 และ CNNM4 ในลำไส้ส่วน duodenum jejunum ileum และ colon กลุ่มที่ได้รับยา Omeprazole เป็นเวลา 12 และ 24 สัปดาห์มีการแสดงออกเพิ่มขึ้นมากกว่ากลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ เมื่อศึกษาตำแหน่งการแสดงออกของโปรตีนโดยทำการแยกโปรตีนที่ผิวเซลล์ และโปรตีนภายใน cytoplasm พบว่าโปรตีน TRPM6 มีการแสดงออกในเยื่อหุ้มเซลล์เพิ่มมากขึ้น แต่มีการแสดงออก TRPM6 ภายใน cytoplasm ลดลง ในลำไส้ส่วน duodenum jejunum ileum และ colon ของกลุ่มที่ได้รับยา Omeprazole เมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุมอย่างมีนัยสำคัญ สำหรับโปรตีน TRPM7 พบว่ามีการแสดงออกของโปรตีนในเยื่อหุ้มเซลล์ลดลง แต่มีการแสดงออกของ TRPM7 ภายในเซลล์เพิ่มมากขึ้นในลำไส้ส่วน duodenum และ jejunum เมื่อศึกษาโปรตีน TRPM6 (TRPM6-IP) ในเยื่อหุ้มเซลล์ ด้วยวิธี immunoprecipitation จากนั้นศึกษาการแสดงออกของโปรตีน TRPM7 ใน TRPM6-IP พบว่าการแสดงออกของโปรตีน TRPM7 ลดลงในลำไส้ส่วน duodenum และ jejunum ของหนูกลุ่มที่ได้รับยา Omeprazole ทั้ง 2 กลุ่ม บ่งชี้ว่ามีการลดลงของ TRPM6/7 heterodimer เมื่อศึกษาด้วยวิธี liquid chromatography coupled with electrospray ionization-quadrupole-time of flight-mass spectrometry (LC-ESI-QTOF-MS/MS) พบว่าโปรตีน TRPM6 มีการกลายพันธุ์โดยลำดับโปรตีน W1814-C1838 มีการขาดหายไปในส่วนของ a-kinase ด้วยกลไกเหล่านี้จึงทำให้การดูดซึม Mg2+ ในลำไส้เล็กของหนู PPIH ลดต่ำลง แม้จะมีการแสดงออกของโปรตีนเพิ่มขึ้น สำหรับการแสดงออกของ CNNM4 มีการแสดงออกในเยื่อหุ้มเซลล์เพิ่มขึ้น ในขณะที่ภายในเซลล์มีการแสดงออกของ CNNM4 ลดลงในลำไส้ส่วน duodenum jejunum ileum และ colon ของกลุ่มที่ได้รับยา Omeprazole ทั้ง 2 กลุ่ม งานวิจัยนี้ แสดงให้เห็นว่าลำไส้มีกลไกการปรับตัวในการดูดซึมแมกนีเซียม Description: Master Degree of Science (M.Sc.); วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต (วท.ม.) 0020-01-01T00:00:00Z http://ir.buu.ac.th/dspace/handle/1513/368 Title: Neuroprotective effect of Celastrus paniculatus standardized extract and its fractions on MPP+-induced neuronal apoptotic cell death in SH-SY5Y cells; ฤทธิ์การปกป้องเซลล์ประสาทของสารสกัดมาตรฐานเมล็ดกระทงลายและเศษส่วนต่อการชักนำการตายแบบอะพอพโตซิสจาก MPP+ ในเซลล์เพาะเลี้ยง SH-SY5Y Abstract: Parkinson’s disease (PD), a neurodegenerative disorder in older is characterized by degenerated or loss the dopaminergic neurons in substantia nigra of striatum. There is previously study reported that apoptosis is a mechanism of dopaminergic neuron death in Parkinson’s disease, involved Bcl-2, anti-apoptotic protein dysregulation. Currently, there's no cure or inhibition of the progressive disorder. Several studies reported that Celastrus paniculatus seed extract (CPSE) has neurological effects by improvement to learning and memory, reduction of free radicals in mice brain tissue and cell cultures. However, the effects of CPSE on neurons of Parkinson’s disease model were not evaluated. Thus, we aimed to examine the neuroprotective effect and inhibiting effect of CPSE and its fraction that partition by hexane (CPSE-E/H), ethyl acetate (CPSE-E/EA) and water (CPSE-E/W) on MPP+ induced apoptotic SH-SY5Y cells. We also studied by using MTT assay, LDH cytotoxicity assay and Western blot on Bcl-2 expression. The results showed that SH-SY5Y cells treatment with 10 µg/ml CPSE for 24 hours are significantly increased cell viability compared to control. We found that pre-treatment and post-treatment with 10 µg/ml CPSE, CPSE -E/H and CPSE-E/EA could significantly decreased cell death in MPP+-induced apoptotic SH-SY5Y cells compared to untreatment control. Furthermore, Bcl-2 expression showed the similar result. In contrast, both treatment with CPSE-E/W did not showed significant differences. The results indicated that CPSE and CPSE-E/H protects SH-SY5Y cells against MPP+-induced apoptotic via Bcl-2 regulator pathway in model of Parkinson’s diseases.; โรคพาร์กินสันเป็นโรคที่พบมากในผู้สูงอายุ เกิดจากความเสื่อมและการตายของเซลล์ประสาทที่สร้างสารสื่อประสาทโดปามีนในสมองส่วนซับสแตนเทียไนกรา มีรายงานว่าเซลล์ประสาทที่เกิดการตายแบบอะพอพโตซิสมีความสัมพันธ์กับโปรตีนในกลุ่ม Bcl-2 ซึ่งในปัจจุบันโรคพาร์กินสันยังไม่มีการรักษาให้หายขาดได้ งานวิจัยที่ผ่านมาพบว่าสารสกัดจากเมล็ดกระทงลายมีฤทธิ์ทางระบบประสาท สามารถเพิ่มความจำและการเรียนรู้ ลดสารอนุมูลอิสระในเนื้อเยื่อสมองหนูไมส์และในเซลล์เพาะเลี้ยง แต่อย่างไรก็ตามยังไม่มีการศึกษาฤทธิ์ของสารสกัดจากเมล็ดกระทงลายต่อการตายของเซลล์ประสาทในโรคพาร์กินสัน ดังนั้นงานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์เพื่อศึกษาผลของสารสกัดจากเมล็ดกระทงลายแบบสกัดหยาบ (CPSE) และแบบเศษส่วนที่มีขั้วต่างกัน 3 ชนิดได้แก่สารสกัดที่แยกด้วยเฮกเซน (CPSE-E/H) เอทิลอะซิเตท (CPSE-E/EA) และน้ำ (CPSE-E/W) ต่อการปกป้องเซลล์ SH-SY5Y ที่ถูกเหนี่ยวนำด้วย MPP+ โดยใช้วิธี MTT วิธี LDH cytotoxicity และวิธี Western blot ผ่านการแสดงออกของโปรตีน Bcl-2 ผลการทดลองแสดงให้เห็นว่าการให้ CPSE ที่ความเข้มข้น 10 µg/ml เป็นเวลา 24 ชั่วโมง เพิ่มอัตราการมีชีวิตของเซลล์ SH-SY5Y ได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม และพบว่าการให้สารสกัด CPSE CPSE-E/H และ CPSE-E/EA แบบ pre-treatment และ post-treatment สามารถลดการตายของเซลล์และเพิ่มการแสดงออกของโปรตีน Bcl-2 จากการเหนี่ยวนำด้วย MPP+ เป็นเวลา 3 ชั่วโมง ได้อย่างมีนัยสำคัญทางสถิติเมื่อเทียบกับกลุ่มควบคุม แต่ไม่มีความแตกต่างในกลุ่ม CPSE-E/W แสดงให้เห็นว่าสารสกัดจากเมล็ดกระทงลายแบบหยาบและเศษส่วน CPSE-E/H สามารถปกป้องเซลล์ประสาทในแบบจำลองโรคพาร์กินสันผ่านการควบคุมของ Bcl-2 Description: Master Degree of Science (M.Sc.); วิทยาศาสตรมหาบัณฑิต (วท.ม.) 0015-01-01T00:00:00Z